浴条件下搅拌。分别于预定的时间取适量释放介质(同时补加等量的释放介质)，高效液相色谱法测定不同时间释放介质中药物含量Al。另一份混悬液用流动相溶解破乳，测定总体药物含量A2。以下式计算不同时间药物释放度，绘制释放曲线。释放度％=(不同时间释放介质中药物含量Al/药物总体含量A2) X 100%。
[0026]实施例1灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体冻干粉的制备
称取磷脂酰胆碱40mg、三油酸甘油醋8.2mg、胆固醇40mg加氯仿-乙醚(1:1)至2ml溶解，作为脂质相；称取泊洛萨姆407 400mg、泊洛萨姆188 40mg、灯盏花素40mg、鹿糖40mg、精氨酸8.7mg加水至2ml，调节ph7.0使溶解，作为内水相；称取赖氨酸5.8mg、葡萄糖30mg，加水至4ml，作为外水相。将内水相缓缓加入脂质相上层，高速剪切匀浆机1000rpm条件下剪切8min，形成油包水型乳液；将上述乳液加入到外水相中，高速剪切匀浆机1000rpm条件下剪切8min形成水包油包水型复乳；复乳氮气吹干除去其中的氯仿、乙醚，即得灯盏花素多囊脂质体混悬液；所得灯盏花素多囊脂质体混悬液1500rpm条件下离心，每次用8ml生理盐水冲洗，共冲洗3次，得灯盏花素多囊脂质体；称取乳糖200mg加适量水溶解，与灯盏花素多囊脂质体混合，加水定容至8ml，冷冻干燥。
[0027]经检测灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体平均粒径20.5Mm，包封率92.3%，药物可达175h缓慢释放，药物体外释放曲线见图1。
[0028]实施例2灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体冻干粉的制备
称取大豆磷脂38mg、三油酸甘油醋10mg、二棕榈酰磷脂酰甘油10mg、胆固醇40mg加氯仿-乙醚(1:1)至2ml溶解，作为脂质相；称取泊洛萨姆407 440mg、泊洛萨姆188 70mg、灯盏花素40mg、鹿糖5mg、精氨酸10.5mg加水至2ml，调节ph7.0使溶解，作为内水相；称取赖氨酸6mg、葡萄糖50mg，加水至4ml，作为外水相。将内水相缓缓加入脂质相上层，高速剪切匀浆机1000rpm条件下剪切8min，形成油包水型乳液；将上述乳液加入到外水相中，高速剪切匀浆机1000rpm条件下剪切Smin形成水包油包水型复乳；复乳氮气吹干除去其中的氯仿、乙醚，即得灯盏花素多囊脂质体混悬液；所得灯盏花素多囊脂质体混悬液1500rpm条件下离心，每次用8ml生理盐水冲洗，共冲洗3次，得灯盏花素多囊脂质体；称取甘露醇560mg加适量水溶解，与灯盏花素多囊脂质体混合，加水定容至8ml，冷冻干燥。
[0029]经检测灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体平均粒径18.2Mm，包封率90.5%，药物可达175h缓慢释放。
[0030]实施例3灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体冻干粉的制备
称取大豆磷脂47mg、三辛酸甘油醋6mg、胆固醇1mg加氯仿-乙醚(1:1)至2ml溶解，作为脂质相；称取泊洛萨姆407 380mg、泊洛萨姆188 10mg、灯盏花素40mg、鹿糖40mg、组氨酸6.5mg加水至2ml，调节ph7.0使溶解，作为内水相；称取聚乙稀醇4mg、葡萄糖20mg，加水至4ml，作为外水相。将内水相缓缓加入脂质相上层，高速剪切匀浆机1000rpm条件下剪切8min，形成油包水型乳液；将上述乳液加入到外水相中，速剪切匀浆机1000rpm条件下剪切Smin形成水包油包水型复乳；复乳氮气吹干除去其中的氯仿、乙醚，即得灯盏花素多囊脂质体混悬液；所得灯盏花素多囊脂质体混悬液1500rpm条件下离心，每次用8ml生理盐水冲洗，共冲洗3次，得灯盏花素多囊脂质体；称取右旋糖酐240mg加适量水溶解，与灯盏花素多囊脂质体混合，加水定容至8ml，冷冻干燥。
[0031]经检测灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体平均粒径17.8Mm，包封率91.2%，药物可达175h缓慢释放。
[0032]对比实施例1灯盏花素普通多囊脂质体冻干粉的制备
参照实施例1处方，区别在于本实施例处方不含泊洛萨姆407及泊洛萨姆188。称取磷脂酰胆碱40mg、三油酸甘油酯8.2mg、胆固醇40mg加氯仿-乙醚(1:1)至2ml溶解，作为脂质相；称取灯盏花素40mg、鹿糖40mg、精氨酸8.7mg加水至2ml，调节ph7.0使溶解，作为内水相；称取赖氨酸5.8mg、葡萄糖30mg，加水至4ml，作为外水相。将内水相缓缓加入脂质相上层，高速剪切匀浆机1000rpm条件下剪切8min，形成油包水型乳液；将上述乳液加入到外水相中，速剪切匀浆机1000rpm条件下剪切Smin形成水包油包水型复乳；复乳氮气吹干除去其中的氯仿、乙醚，即得灯盏花素多囊脂质体混悬液；所得灯盏花素多囊脂质体混悬液1500rpm条件下离心，每次用8ml生理盐水冲洗，共冲洗3次，得灯盏花素多囊脂质体；称取乳糖200mg加适量水溶解，与灯盏花素多囊脂质体混合，加水定容至8ml，冷冻干燥。
[0033]经检测灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体平均粒径16.8Mm，包封率63.3%，药物释放可达89h，释放初始阶段存在突释现象，释放曲线见图4。
[0034]由本对比实施例可知，采用本发明技术方案，泊洛萨姆407和泊洛萨姆188可减少多囊脂质体冷冻干燥过程中的药物渗漏，避免多囊脂质体药物突释现象，使药物释放更加缓慢平稳。
【主权项】
1.一种含有灯盏花素的内相凝胶化多囊脂质体冻干粉，其特征在于，包括下列重量份的各组分:灯盏花素I份、中性磷脂0.95-1.18份、负电荷磷脂0.025-0.25份、胆固醇0.25-1份、三酸甘油酯0.15-0.25份、蔗糖0.125-1份、内水相辅助乳化剂0.163-0.263份、泊洛沙姆407 9.5-11份、泊洛沙姆188 0.25-1.75份、葡萄糖0.5-1.25份、外水相辅助乳化剂0.1-0.15份、支持剂6-14份。
2.如权利要求1所述的多囊脂质体冻干粉，其特征在于，所述中性磷脂选自卵磷脂、大豆磷脂、氢化大豆磷脂、磷脂酰胆碱、脑磷脂、鞘磷脂、、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰乙醇胺中的一种或几种。
3.如权利要求1所述的多囊脂质体冻干粉，其特征在于，所述负电荷磷脂选自磷脂酰丝氨酸、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸、二硬脂酰磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、二棕榈酰磷脂酰肌醇、二硬脂酰磷脂酰肌醇、磷脂酸二棕榈酰磷脂酸和二硬脂酰磷脂酸中的一种或几种。
4.如权利要求1所述的多囊脂质体冻干粉，其特征在于，所述的三酸甘油酯选自三油酸甘油酯、三辛酸甘油酯中的一种或两种。
5.如权利要求1所述的多囊脂质体冻干粉，其特征在于，所述的内水相辅助乳化剂选自赖氨酸、甘氨酸、组氨酸、聚乙烯醇、右旋糖酐、羟甲基淀粉、羟乙基淀粉、明胶、海藻酸钠和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或几种。
6.如权利要求1所述的多囊脂质体冻干粉，其特征在于，所述的外水相辅助乳化剂选自赖氨酸、甘氨酸、组氨酸、聚乙烯醇、右旋糖酐、羟甲基淀粉、羟乙基淀粉、明胶、海藻酸钠和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或几种。
7.如权利要求1所述的多囊脂质体冻干粉，其特征在于:所述支持剂选自山梨醇、甘露醇、蔗糖、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖中的一种或几种。
8.如权利要求1-7任一项所述的多囊脂质体冻干粉的制备方法，其特征在于:包括下列步骤: A、按重量份计将中性磷脂0.95-1.18份、负电荷磷脂0.025-0.25份、胆固醇0.25-1份、三酸甘油酯0.15-0.25份溶解于氯仿-乙醚(1:1)，作为脂质相，使中性磷脂在脂质相中的浓度为 19-23.5mg/ml ； B、按重量份计将蔗糖0.125-1份、内水相辅助乳化剂0.163-0.263份、泊洛沙姆4079.5-11份、泊洛沙姆188 0.25-1.75份、灯盏花素I份溶解于水中，调Ph7.0作为内水相，使灯盏花素的终浓度为20mg/ml ； C、按重量份计将葡萄糖0.5-1.25份、外水相辅助乳化剂0.1-0.15份溶解于水中，作为外水相，使葡萄糖浓度为5-12.5mg/ml ； D、将内水相缓慢加入脂质相上层，所述内水相和脂质相的体积比为1:(1-1.2)，高速剪切形成油包水型乳液； E、将上述乳液加入到外水相中，所述乳液与外水相的体积比为1:(1-2)，高速剪切形成水包油包水型复乳； F、将复乳氮气吹干除去其中的氯仿、乙醚，即得灯盏花素多囊脂质体混悬液； G、将步骤F所得灯盏花素多囊脂质体混悬液1500rpm条件下离心，每次用2倍于步骤E所用外水相体积的生理盐水冲洗，共冲洗3次，得灯盏花素多囊脂质体； H、按重量份计将6-14份支持剂溶解于水中，与步骤G灯盏花素多囊脂质体混合，使支持剂终浓度为30mg/ml-70mg/ml，冷冻干燥。
9.如权利要求8所述的多囊脂质体冻干粉的制备方法，其特征在于:步骤所述高速剪切条件为:高速剪切匀浆机在1000rpm的转速下作用8min。
【专利摘要】本发明目的是为了提供一种体内外性质稳定、包封率高、释药缓慢的灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体冻干粉及其制备方法。本发明灯盏花素内相凝胶化多囊脂质体包括按重量份计的以下原辅料组分：灯盏花素1份、中性磷脂0.95-1.18份、负电荷磷脂0.025-0.25份、胆固醇0.25-1份、三酸甘油酯0.15-0.25份、蔗糖0.125-1份、内水相辅助乳化剂0.163-0.263份、泊洛沙姆407 9.5-11份、泊洛沙姆188 0.25-1.75份、葡萄糖0.5-1.25份、外水相辅助乳化剂0.1-0.15份、支持剂6-14份。